摘要：为筛选出对柑橘疮痂病病菌［痂圆孢菌（Ｓｐｈａｃｅｌｏｍａ ｆａｗｃｅｔｔｉ Ｊｅｎｋｉｎｓ）］高效、低毒、低残留药剂供生产上使用，采用生长速率法测定了９种杀菌剂对该菌的室内毒力。结果表明，９种药剂对柑橘痂圆孢菌菌丝生长的抑制效果不同，２５％咪酰胺ＥＣ和１０％苯醚甲环唑ＷＧ抑菌作用最强，其ＥＣ５０值分别为０．０２６ ７ μｇ／ｍＬ和０．０３６ ２ μｇ／ｍＬ；６０％唑醚·代森联ＷＧ次之，其ＥＣ５０值为１．６１０ １ μｇ／ｍＬ，抑菌作用也较强；７５％代森锰锌ＷＧ和３％中生菌素ＷＰ有较好抑菌活性，其ＥＣ５０值均小于４２ μｇ／ｍＬ；２５％嘧菌酯ＳＣ效果最差，ＥＣ５０值为８０ ２７４．９７０ １μｇ／ｍＬ。
关键词：柑橘疮痂病；杀菌剂；毒力测定
中图分类号：S436.661；S482.2 文献标识码：Ａ 文章编号：0439－８114（２０11）09－1806-03
Ｔｏｘｉｃｉｔｙ Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ ｏｆ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ Ｆｕｎｇｉｃｉｄｅｓ ｏｎ Ｃｉｔｒｕｓ Ｓｃａｂ Ｄｉｓｅａｓｅ
ＺＨＯＵ Ｘｉａｏ－ｙａｎ，ＪＩＡＮＧ Ｙｕ－ｌａｎ
（Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｇｕｉｚｈｏｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｇｕｉｙａｎｇ ５５００２５，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｓｃｒｅｅｎ ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ， ｌｏｗ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ａｎｄ ｌｏｗ ｒｅｓｉｄｕａｌ ｆｕｎｇｉｃｉｄｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ａｌｔｅｒｎａｎｔ ｕｓｅ ｉｎ ｃｉｔｒｕｓ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ， ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ ｏｆ ｎｉｎｅ fungｉｃｉｄｅｓ ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ ｏｎ ｃｉｔｒｕｓ ｓｃａｂ ｄｉｓｅａｓｅ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ ｇｒｏｗｔｈ ｒａｔｅ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｎｉｎｅ fungｉｃｉｄｅｓ ｈａｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｎ ｍｙｃｅｌｉｕｍ ｇｒｏｗth ｏｆ Sphaceloma fawcetti． Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ２５％ Ｐｒｏｃｈｌｏｒａｚ ＥＣ ａｎｄ １０％ Ｄｉｆｅｎｏｃｏｎａｚｏｌｅ ＷＧ behaved ｂｅｓｔ， ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ＥＣ５０ ｗｅｒｅ ０．０２６ ７ μｇ／ｍＬ ａｎｄ ０．０３６ ２ μｇ／ｍＬ， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅly； followed by ６０％ Ｐｙｒａｃｌｏｓｔｒｏｂｉｎ·Ｍｅｔｉｒａｍ ＷＧ ｗｈｏｓｅ ＥＣ５０ ｗａｓ １．６１０ １ μｇ／ｍＬ. Ｔｈｅ ＥＣ５０ ｏｆ ７５％ Ｍａｎｃｏｚｅｂ ＷＧ ａｎｄ ３％ Ｚｈｏｎｇｓｈｅｎｇｍｙｃｉｎ ＷＰ was both ｌｅｓｓ ｔｈａｎ ４２ μｇ／ｍＬ； ｗｈｉｌｅ ２５％ Ｃｈｌｏｒｏｎｉｔｒｏｐｒｏｐａｎｅ ＳＣ behaved ｗｏｒｓｔ， ａｎｄ ｉｔｓ ＥＣ５０ ｗａｓ ８０ ２７４．９７０ １ μｇ／ｍＬ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｃｉｔｒｕｓ ｓｃａｂ ｄｉｓｅａｓｅ； ｆｕｎｇｉｃｉｄｅ； ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ
柑橘是贵州的传统栽培水果，其栽培历史悠久，分布面积广，种类、品种繁多［１］。柑橘疮痂病是由柑橘痂圆孢菌（Ｓｐｈａｃｅｌｏｍａ ｆａｗｃｅｔｔｉ Ｊｅｎｋｉｎｓ）引起的一种真菌病害，是柑橘上的重要病害之一，在我国柑橘产区均有分布和危害，也是阻碍贵州柑橘产业健康发展的重要病害，此病主要为害柑橘的叶、梢和果实，引起落叶和嫩梢生长不良，果实被害后容易脱落，不落的果实果形变小，品质低劣，严重影响产量及其商品性［２，3］。特别是近几年来，随着山区农业的开发，柑橘种植面积逐年扩大，疮痂病也随之加重。
如何有效控制疮痂病的发生与危害，已成为当前柑橘种植业亟待解决的重要课题，而药剂防治仍然是目前最有效的防治方法之一。因此，有必要加强高效、低毒、低残留药剂的筛选及使用技术研究。笔者就９种药剂对柑橘痂圆孢菌的毒力进行了室内试验，现将试验结果报道如下。
１材料与方法
１．１材料
１．１．１病原菌供试病原菌来源，分离自２００９年９月从贵州天柱县采集的柑橘疮痂病叶。
１．１．２供试药剂供试药剂和有效浓度详见表１。
１．１．３培养基ＰＤＡ培养基和含药培养基，自配。
１．２方法
１．２．１培养基配制
１）ＰＤＡ培养基。去皮马铃薯２００ ｇ，琼脂２０ ｇ、葡萄糖１５ ｇ、水１ ０００ ｍＬ。
２）含药培养基。将表１中不同药剂分别用无菌水配制成所需各浓度的１０倍，然后以１∶９的体积比与ＰＤＡ培养基混合均匀即得系列浓度梯度的含药培养基。
１．２．２病原菌的分离纯化采用常规方法分离纯化，经鉴定病原菌为柑橘痂圆孢菌（Ｓｐｈａｃｅｌｏｍａ ｆａｗｃｅｔｔｉ Ｊｅｎｋｉｎｓ），属半知菌亚门，黑盘孢目，痂圆孢属［4］。
１．２．３测定无菌条件下将待测菌株接种在ＰＤＡ平板上于２５ ℃下培养。培养１０ ｄ后用内径为０．５ ｃｍ的打孔器在菌落上打取菌饼（选取菌落边缘生长旺盛的菌丝），转接到含有不同药剂的ＰＤＡ平板上（带菌丝的一面接触培养基）。以不加药剂而加入等量无菌水为对照（ＣＫ），每种药剂设计５个浓度处理，每个处理设３次重复，在２５ ℃恒温下培养６ ｄ。用十字交叉法测量菌落直径，取平均值，计算抑制率。
抑制率＝［（对照菌落直径－０．５ ｃｍ）－（处理菌落直径－０．５ ｃｍ）］／（对照菌落直径－０．５ ｃｍ）×１００％
以处理浓度（μｇ／ｍＬ）的对数值为横坐标和相应抑制几率值为纵坐标求出毒力回归方程，并求出抑制中浓度（ＥＣ５０）及相关系数（ｒ）［5］，以上计算由ＤＰＳ软件辅助完成［6］。
２结果与分析
２．１９种杀菌剂对柑橘痂圆孢菌的抑制作用
９种杀菌剂对柑橘痂圆孢菌菌丝的抑制作用测定结果（表２）表明，在各种药剂设定的药剂浓度范围内，菌丝的生长均受到不同程度的抑制。从抑制率大小看，随着各种药剂浓度的增加，抑制率也随之增大，２５％咪酰胺ＥＣ的使用浓度从０．００５ μｇ／ｍＬ增至１．２８ μｇ／ｍＬ，抑制率相应由２５．９４％增至９６．６２％；１０％苯醚甲环唑ＷＧ的使用浓度从０．５ μｇ／ｍＬ增至３ ２００ μｇ／ｍＬ，其抑制率由５６．００％增至１００．００％。其他药剂都存在同样的情形，药剂浓度与抑制作用呈正相关。
２．２９种杀菌剂对柑橘痂圆孢菌的毒力比较
从表３可知，９种供试药剂的浓度与抑菌率的相关系数几乎均达显著水平，说明两者间呈直线相关。ＥＣ５０值可用来比较杀菌剂对供试菌株的毒力强弱［7］。９种药剂对柑橘痂圆孢菌菌丝生长的抑制效果不同，从药剂间的ＥＣ５０值看，２５％咪酰胺ＥＣ的抑菌作用最强，其ＥＣ５０值为０．０２６ ７ μｇ／ｍＬ；１０％苯醚甲环唑ＷＧ次之，其ＥＣ５０值为０．０３６ ２ μｇ／ｍＬ；６０％唑醚·代森联ＷＧ的ＥＣ５０值为１．６１０ １ μｇ／ｍＬ，其抑菌作用也较强；７５％代森锰锌ＷＧ和３％中生菌素ＷＰ有较好抑菌活性，其ＥＣ５０值分别为３０．９０６ ８ μｇ／ｍＬ和４１．７５４ ４ μｇ／ｍＬ；７５％百菌清ＷＰ的ＥＣ５０值为２７９．５７６ １ μｇ／ｍＬ，抑菌活性一般；相比之下，５０％疮炭煤烟净ＷＰ、７０％代森联ＷＰ和２５％嘧菌酯ＳＣ的抑菌活性较差，其ＥＣ５０值均大于２ ０００ μｇ／ｍＬ，尤以２５％嘧菌酯ＳＣ的抑菌作用最差，ＥＣ５０值为
８０ ２７４．９７０ １ μｇ／ｍＬ。
３小结与讨论
室内试验结果表明，９种杀菌剂对柑橘疮痂病菌（痂圆孢菌）菌丝的生长均有不同程度的抑制作用，从ＥＣ５０值看，不同杀菌剂的毒力大小依次为２５％咪酰胺ＥＣ＞１０％苯醚甲环唑ＷＧ＞６０％唑醚·代森联ＷＧ＞７５％代森锰锌ＷＧ＞３％中生菌素ＷＰ＞７５％百菌清ＷＰ＞５０％疮炭煤烟净ＷＰ＞７０％代森联ＷＰ＞２５％嘧菌酯ＳＣ。其中，２５％咪酰胺ＥＣ和１０％苯醚甲环唑ＷＧ抑菌作用最强，６０％唑醚·代森联ＷＧ次之，其抑菌作用也较强；７５％代森锰锌ＷＧ和３％中生菌素ＷＰ有较好抑菌活性，其ＥＣ５０值均小于４２ μｇ／ｍＬ，而５０％疮炭煤烟净ＷＰ、７０％代森联ＷＰ和２５％嘧菌酯ＳＣ室内抑菌效果较差。目前，前５种药剂对柑橘疮痂病菌菌丝毒力较高，推广使用价值大，可进一步对５种药剂的大田防效进行试验，最终明确当前柑橘疮痂病的有效防治药剂及使用浓度。
参考文献：
［１］ 杨登华，侯天荣，覃世霞．贵州南部地区柑橘果树自然资源及生产现状调查［Ｊ］． 贵州农业科学，２００８，３６（６）：１４９－１５１．
［２］ 孙华阳．柑橘生产技术大全［Ｍ］． 北京：农业出版社，１９９０．
［3］ 陈翾，张宏梓，詹桂尧，等． 尤溪金柑主要病虫害综合防治技术［J］． 南方农业，2010（1）：19-21．
［4］ 陆家云．植物病害诊断［Ｍ］．北京：中国农业出版社，１９９７．
［5］ 孙广宇，宗兆锋．植物病理学实验技术［Ｍ］． 北京：中国农业出版社，２００２．２０６．
［6］ 唐启义，冯明光．实用统计分析及其计算机处理平台［Ｍ］． 北京：中国农业出版社，１９９７．１３５－１３９．
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