摘要 简述氢化物发生原子荧光光谱法的性能，说明该方法在保健品检测中的应用前景，研究氢化物发生原子荧光光谱对保健品中硒的测定方法，归纳出测定保健品中不同含量硒的适宜条件。
关键词 硒；原子荧光；测定；保健品
硒是一种较稀有的准金属元素，对人体健康有如下作用：①硒是谷胱甘肽过氧化物酶的组成成分，清除体内过氧化物，保护细胞和组织免受过氧化物的损害；②非酶硒化物具有很好的清除体内自由基的功能，可提高肌体的免疫力，抗衰老；③可维持心血管系统的正常结构和功能，预防心血管病；④是部分有毒的重金属元素如镉、铅的天然解毒剂；⑤有效提高肌体免疫力，具有抗化学致癌功能；⑥预防和治疗克山病和大骨节病。
硒缺乏是引起克山病的一个重要病因，缺硒还会诱发肝坏死及心血管方面的疾病。硒的需要量和中毒量之间比较接近，摄入过量的硒将引起硒中毒，其症状为：胃肠障碍、腹水、贫血、毛发脱落、指甲及皮肤变形、肝脏受损。天然食品中硒含量很少，目前含硒的产品大多为含有机硒的各种保健制品。
硒是保健品检测的重要分析项目，目前保健品中硒的测定方法主要有：①氢化物发生原子荧光光谱法；②氢化物发生原子吸收光度法；③火焰原子吸收分光光度计法；④石墨炉原子吸收分光光度计法；⑤荧光分光光度计法；⑥分光光度法；⑦气相色谱法；⑧催化极谱法。方法②和③灵敏度较高；方法④的灵敏度非常高，但是基体干扰严重，效果不理想；方法⑤和⑥灵敏度较低，试剂不稳定，线形范围窄；方法⑦和⑧操作繁琐，目前在各检验机构中未普及；笔者在工作研究过程中对方法①进行了详细的分析，认为该方法简单、快捷、准确，适用于不同含量的样品，较好地解决了保健品中硒的测定。
1材料与方法
1.1主要仪器与试剂
（1）仪器。AFS-230E型断续流动双道无色散型氢化物原子荧光光谱仪，附有石英原子化器、断续流动仪和空心阴极灯，仪器分析条件见表1。
（2）药剂。硼氢化钠溶液：配制浓度10g/L，以5g/L氢氧化钠为介质，现配现用；铁氰化钾：配制浓度100 g/L；混合酸：硝酸/高氯酸=4/1，优级纯；硒标准溶液：先配制100μg/mL硒标准溶液，然后逐级稀释成浓度为10μg/mL和1μg/mL的硒标准溶液；硒的标准工作曲线：0ng/mL，10.0ng/mL，20.0ng/mL，30.0ng/mL，40.0ng/mL， 50.0ng/mL；氩气：纯度99.999%。
（3）样品。富硒康，富硒茶，魔芋。
1.2实验原理
样品经混合酸的加热硝化，将六价硒还原成四价硒，然后经过断续流动泵（操作条件见表2），在酸性介质中被还原剂硼氢化钠由四价硒还原成硒化氢，由氩气带入原子化器进行原子化，在空心阴极灯的照射下，硒原子激发出特征波长的荧光，荧光强度与硒含量成正比，与标准系列比较定量。
1.3实验步骤
称取一定质量试样加一定体积混合酸（硝酸∶高氯酸=4∶1），加盖静置过夜。次日于电热板上加热，当溶液清亮透明并伴有白烟时，继续加热至试样体积将干未干，此过程要及时补混合酸。冷却后加一定体积盐酸（5moL/L），继续加热至试样体积将干未干，再加少许实验用水赶酸。冷却，转移定容，同时作空白。配制浓度为0ng/mL、10.0ng/mL、20.0ng/mL、30.0ng/mL、40.0ng/mL、50.0ng/mL的标准液并制作标准工作曲线。吸取标准液和试样各10mL，各加入一定的浓盐酸和铁氰化钾，混匀待测。
2结果与讨论
2.1最佳的仪器分析条件
2.1.1灯电流与负高压的选择。选择过大的灯电流会缩短灯的寿命，也会导致工作曲线线形不好，而灯电流过低会造成能量不足；同时在能够满足灵敏度的基础上，尽量采用较低的负高压，经过实验选择，灯电流为80mA，负高压为340V。
2.1.2炉温与炉体高度。石英炉的温度至少应维持在能够将氩氢焰点燃的程度上，较低的炉温不易克服复杂样品的气相干扰，过高的炉温会使灵敏度降低并增加噪声，取50.0ng/mL的硒溶液进行不同温度的原子化试验，原子化温度750~800℃比较适宜；炉高也是很重要的参数，炉高过高，光源辐射到炉上引起的反射光强，产生较高空白；炉高过低，光束照射在尾焰上易波动，会降低灵敏度和精度。本试验中炉高选择7.5mm。
2.1.3载气及屏蔽气的选择。载气气流过低起不到搅拌的作用，很难将氢化物带到石英炉，容易出现记忆效应。载气气流过高会稀释氢化物，降低荧光值。载气气流量最好是400mL/min。屏蔽器流量最好是1 000mL/min，可以杜绝周围空气的渗入，保证稳定的荧光效果。
2.2硼氢化钠的用量
作为还原剂，如果硼氢化钠浓度低，那么还原高价硒的能力不强，灵敏度不高；如果硼氢化钠浓度高，则还原能力强，但是产生大量氢气，反而会降低灵敏度。根据实验中硒的荧光强度随硼氢化钠的变化（如图1），硼氢化钠浓度在10g/L时，硒的荧光强度基本上可以达到最大。同时，硼氢化钠应溶于氢氧化钠中，氢氧化钠浓度在0.5%比较合适，再低就难以抑制硼氢化钠的分解了。
2.3共存离子的干扰及消除
Cu、Ag等元素对硒形成严重干扰，Fe、Mn、Cr、Zn、K、Na、Ca、Mg等元素对硒不干扰。Cu对硒的干扰最大，因为Cu2+优先与硼氢化钠反应，减少了硒的氢化物的生成。可以通过Fe3+优先于Cu2+与硼氢化钠反应生成Fe2+，促使硒的氢化物生成。
2.4不同介质的选择
分别以盐酸、硫酸、硝酸、高氯酸和磷酸作为实验介质，发现硫酸中常含有硒，硝酸、高氯酸的氧化性强，磷酸的粘性大，只有硒在盐酸介质中稳定，荧光效果最好。
2.5样品测定
分别向富硒康、富硒茶、魔芋中加入0.2μg的四价硒，测定其回收率，结果比较满意（见表3）。
2.6线性范围和检出限
在本实验中，硒含量在0~100μg/L内呈现线形关系，相关系数r=0.999 6，经过12次空白值的测定，得出该方法检出限为0.20μg/L。
注：本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文。