摘要[目的]建立高效液相色谱方法快速测定马铃薯茎叶、块茎及其土壤中霜脲氰残留量的方法。[方法]样品经乙腈提取，NH2固相萃取小柱净化后，以乙腈-水为流动相，使用C18色谱柱，通过Waters 2695高效液相色谱-紫外检测器，在254 nm检测波长下对霜脲氰进行分析检测，面积外标法定量。[结果]在0.1、0.5、2.0 mg/kg 3个不同添加浓度水平下，马铃薯茎叶中平均回收率为78.0%～1044%，相对标准偏差为2.7%～3.4%；马铃薯块茎中平均回收率为82.9%～94.7%，相对标准偏差为1.1%～2.3%；土壤中平均回收率为81.6%～91.8%，相对标准偏差为3.3%～5.4%。霜脲氰在浓度为0.05～2.00 mg/L时线性关系良好（r=0.999 8），最小检出量为0.06 ng，在马铃薯茎叶、块茎和土壤中的最低检测浓度均为10 μg/kg。[结论]该方法简便、快捷、成本低、精密度好、准确率高，适用于马铃薯及其土壤中霜脲氰的大批量分析检测，是一种较为实用的检测方法。
关键词马铃薯；土壤；霜脲氰；高效液相色谱
中图分类号S481+.8文献标识码A文章编号0517-6611（2018）05-0193-03
Abstract[Objective] A rapid determination method was established for the residue of cymoxanil in potato stem leaf， tuber and soil by HPLC. [Method] The samples were extracted with acetonitrile and purified by NH2 solidphase extraction column. Analysis and determination were conducted by Waters 2695 HPLC with C18 column and UV detector at 254 nm， and CH3CNH2O was utilized as the mobile phase. The residues were quantified by area of external standard method. [Result] When the concentration levels were added at different levels of 0.1， 05 and 2.0 mg/kg， the average recoveries of residues were 78.0%-104.4% with RSD of 2.7%-3.4% in potato stem leaves， and 829%-94.7% with RSD of 1.1%-2.3% in potato tubers， and 81.6%-91.8% with RSD of 3.3%-5.4% in soil. The linear relationship was obtained in the concentration that range from 0.05 to 2.00 mg/L for cymoxanil （r=0.999 8）. The minimum detectable amount of cymoxanil was 0.06 ng. The minimum detectable concentrations of cymoxanil was 10 μg/kg in potato stem leaf， tuber and soil. [Conclusion] This method has advantages of simple， rapid， low cost， good precision and high accuracy， which is a practical detection method for the large batch analysis of cymoxanil in potato and soil.
Key wordsPotato；Soil；Cymoxanil；High performance liquid chromatography
霜脲氰（Cymoxanil），化学名称为1-（2-氰基-2-甲氧基亚胺基）-3-乙基脲，分子式为C7H10N4O3，是一种具有内吸作用的脲类高效杀菌剂，常与其他保护性杀菌剂混用以提高残留活性，对番茄、黄瓜、葡萄等作物的霜霉病和马铃薯晚疫病有明显的防治效果[1-4]。目前，霜脲氰单残留分析检测方法多以液相色谱法为主[5-9]，但大多前处理复杂，样品净化条件要求苛刻。笔者采用高效液相色谱法，通过简化样品提取、净化及上机条件，建立了马铃薯茎叶、块茎及其土壤中霜脲氰快速分析方法，旨在为马铃薯及其土壤中霜脲氰的大批量分析检测提供参考。
1材料与方法
1.1材料
Waters 2695高效液相色譜仪及2487紫外吸收检测器（美国Waters公司）；电子天平（PL202-L和XS205各1台，瑞士METTLER TOLEDO公司）；恒温振荡器（CHA-S，常州国华电器有限公司）；低速台式离心机（TDL-40，上海安亭科学仪器厂）；旋转蒸发器（R-215，瑞士BUCHI公司）；氮吹仪（N-EVAP-12，美国Organomation公司）；纯水机（美国 Millipore公司）；NH2固相萃取小柱（500 mg/6mL，美国Agilent公司）。
甲醇、乙腈、二氯甲烷为色谱纯（美国Fisher公司）；氯化钠（分析纯，天津市光复科技发展有限公司）经140 ℃烘烤6 h后，置于干燥器中保存；霜脲氰标准品（0.1 g，纯度995%，德国Dr.Ehrenstorfer公司）；试验用水为18.2 MΩ·cm的高纯水。
1.2方法
1.2.1标准溶液的配制。
称取0.010 05 g霜脲氰标准品，用10 mL甲醇配制成1 000 mg/L标准溶液母液，量取1.0 mL标准溶液母液于100 mL容量瓶中，用甲醇定容，配制成10 mg/L 标准储备液，置于-20 ℃冰箱中保存待用。
1.2.2样品前处理。
1.2.2.1提取。
称取10.00 g土壤或匀浆好的马铃薯茎叶或块茎样品，置于50 mL离心管中，加入20 mL乙腈，振荡提取30 min后加入3 g氯化钠，振摇2 min，以4 000 r/min离心5 min。吸取10.0 mL离心后的提取液于250 mL浓缩瓶中，浓缩至近干，加入二氯甲烷+甲醇（95+5）约3 mL，待净化。
1.2.2.2净化。
用约 4mL二氯甲烷+甲醇（95+5）预淋NH2固相萃取小柱，当溶剂液面到达柱吸附层表面时，立即将上述提取所得溶液转移至NH2固相萃取小柱中，用7.5 mL二氯甲烷+甲醇（95+5）将浓缩瓶中的残余物分3次洗入NH2固相萃取小柱，收集洗脱液于10 mL刻度试管中，氮气吹干后用甲醇定容至5.00 mL，过0.22 μm有机滤膜于进样小瓶中，待测。
1.2.3仪器色谱条件。
色谱柱：CAPCELL PAK C18柱（250 mm×3 mm，5 μm）；流动相：乙腈-水（体积比30∶70）；流速：0.7 mL/min；进样体积：10.0 μL；检测波长：254 nm；柱温：40 ℃。
1.2.4方法的线性关系考察。用霜脲氰标准储备液配制005、0.10、0.20、0.50、1.00、2.00 mg/L 6个不同系列浓度的标样，在“1.2.3”条件下进样测定，以保留时间定性、峰面积定量，以霜脲氰标样的峰面积为纵坐标（Y），质量浓度（mg/L）为横坐标（X）进行线性回归。
1.2.5添加回收率试验。在马铃薯茎叶、块茎及土壤试样中分别添加0.1、0.5、2.0 mg/kg的霜脲氰，并设空白对照，分别重复5次，按“1.2.2”样品前处理方法和“1.2.3”仪器色谱条件进行提取检测，计算方法的回收率及变异系数。
2结果与分析
2.1方法的线性关系和灵敏度
以霜脲氰标样的质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线（图1），得到线性回归方程为：Y=31 514X-16.723（r=0.999 8）。色谱见图2。
灵敏度以3倍信噪比（S/N）所对应的标样浓度来确定，霜脲氰的最低检出浓度为6.0 μg/L，最低检出量为0.06 ng。
2.2方法的准确度和精密度
由表1可知，霜脲氰在马铃薯茎叶中平均回收率為78.0%～104.4%，相对标准偏差为2.7%～3.4%；在马铃薯块茎中平均回收率为82.9%～947%，相对标准偏差为1.1%～2.3%；在土壤中平均回收率为81.6%～91.8%，相对标准偏差为3.3%～5.4%，表明该方法的准确度较高，精密度良好，符合农药残留试验准则所规定的农残分析的要求[10]。霜脲氰在马铃薯茎叶、块茎和土壤中的最低检测浓度均为10 μg/kg，HPLC图谱见图3。
3结论
建立了马铃薯与土壤中霜脲氰残留量的快速前处理方
法和液相色谱分析条件，该方法的准确度、精密度和灵敏度均较高，符合农药残留分析的要求。该法操作简便快速，准确灵敏，有机溶剂消耗量相对较低，适合大批量样品的快速处理，是一种较为实用的检测方法。
参考文献
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